* Qubit 4.0 사용동영상

Quantitate DNA, RNA, or Protein with the new Qubit 4 Fluorometer

Invitrogen Qubit 4 and RNA Quantification and Qualification

* Qubit 4.0 메뉴얼

시약 사용법 간단히 정리해서 보내드리면,

1.  Working solution 준비 -> qubit buffer : qubit reagent = 200 : 1
   
   
2.  sample & standard 준비 -> fill up 200 ul with working solution at Qubit tube 
    (mix나 handling 시 tube 아래쪽 잡지않도록 해주세요.)
   - sample : 1-20 ul
   - Standard : 10ul
   
   
3. Incubation : 실온/ table 에서 반응하셔도 되며, protein의 경우 mix 후 서랍장이나 어두운 곳에서 incubation 해주세요.
   - DNA & RNA : 2 min
   - Protein : 15 min
   
   
4. Read : tube 넣고 장비 뚜껑 닫고 읽어주세요.
   

* Qubit 시약 중 DNA & RNA 샘플 정량 시에는 HS(high sensitive) or BR(broad range)가 있으며,  정량 샘플의 농도에 따라 선택하시면 됩니다.

• 일반적으로 cell, 조직에서 뽑은 샘플은 BR, 머리카락, 흙 등 농도가 낮게 뽑히는 샘플의 경우 HS 사용하시면 됩니다.

* Qubit RNA IQ assay

: RNA 샘플을 이용해서 QPCR, NGS 등의 실험을 하실 경우 RNA quality 가 중요한데, 지금까지는 쉽게 전기영동을 통해 보시거나 bio analyzer 장비를 이용한 RIN 값으로 보실 수 있었습니다.

전기영동 결과의 경우 샘플 quality 를 대략으로 추정할 수 밖에없었고, bio analyzer는 장비와 소모품 가격이 비싸서 service 업체를 통해 하더라도 비용이 많이 나가게 됩니다.

이 것을 Qubit 시약으로 대체할 수 있게 되었고, bio analyzer의 RIN 값보다 더 직관적인 결과로 실험에 유의한 결과를 보임을 확인하였습니다.

최근에는 논문 reviewer도 RNA quality를 요구하는 경우도 늘고, cDNA합성 효율이 실험 결과에 영향을 미쳐 이 부분을 확인하는 연구자들이 늘고 있습니다.

관련하여 참고하실 수 있도록 자료보내드립니다.

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